【摘 要】
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【目的】为了将表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin Gallate，EGCG）的2种衍生物和过硫酸氢钾复合物粉（Compound Potassium Peroxymonosulfate Powder， KMPS）运用于体外细胞实验中，以评估这3种药物对I型草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus， GCRV）的抑制和杀灭效果。【方法】利用 MUSE 法和 CCK
【基金项目】
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国家现代农业产业技术体系资助（CARS-45-16）； 农业科研杰出人才培养计划（13210256）；
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【目的】为了将表没食子儿茶素没食子酸酯（Epigallocatechin Gallate，EGCG）的2种衍生物和过硫酸氢钾复合物粉（Compound Potassium Peroxymonosulfate Powder， KMPS）运用于体外细胞实验中，以评估这3种药物对I型草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus， GCRV）的抑制和杀灭效果。【方法】利用 MUSE 法和 CCK-8 法评估表没食子儿茶素没食子酸酯棕榈酸酯（Epigallocatechin Gallate Palmitate， EGCG-P）、乙酰化表没食子儿茶素没食子酸酯（Peracetylated Epigallocatechin Gallate， AcEGCG）和过硫酸氢钾复合物粉3种药物对细胞的安全浓度，利用体外细胞感染病毒模型，使用不同浓度测试物处理病毒或细胞后感染病毒，通过Real-time PCR法分析不同测试物对病毒的抑制和杀灭效果。使用不同浓度测试物处理细胞后，利用Real-time PCR法检测宿主免疫相关基因变化情况。【结果】 EGCG-P和 AcEGCG 对 GCRV-JX01 感染细胞的抑制作用呈剂量依赖性，且 EGCG-P 的抑制效果优于 AcEGCG，EGCG-P 浓度为 10 μg/mL 和 40 μg/mL 时病毒量相对于对照组上清中病毒的滴度分别降低了 102 和 103 copies/μL，而AcEGCG浓度为 60 μg/mL 和 120 μg/mL 时才能达到相同抑制效果。杀灭实验结果表明，EGCG-P、AcEGCG和KMPS对GCRV-I毒株均有杀灭效果，最低有效杀灭剂量 KMPS（5 μg/mL）＜ EGCG-P（120 μg/mL）＜ AcEGCG（180 μg/mL）。草鱼白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子α（TNFα）和髓样分化因子（MyD88）相对于对照组在测试物中均有不同程度上调，其中 EGCG-P（50 μg/mL）和AcEGCG（10 μg/mL）处理组分别在 8 h 和 24 h 上调较为显著。【结论】 EGCG-P、AcEGCG 和 KMPS 对 GCRV-I 均有良好的抑制效果和杀灭效果，其中 EGCG-P 和 KMPS 能够在 40 μg/mL 较低浓度下对 GCRV 发挥显著性的抑制和杀灭效果，且在 24 h 后不会引起机体产生炎症反应。本研究为拮抗草鱼呼肠孤病毒环境友好型消毒产品的开发提供参考。
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