【摘 要】
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目的：建立特异、灵敏、快速的TaqMam实时荧光定量PCR方法,用于烟草环斑病毒（TRSV）的定量检测。方法：用纳米磁珠法提取病毒RNA,构建包含烟草环斑病毒全CP序列的质粒标准品。根据CP
【机 构】
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中国检验检疫科学研究院动植物检疫实验所,中国农业大学植物检疫系
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目的：建立特异、灵敏、快速的TaqMam实时荧光定量PCR方法,用于烟草环斑病毒（TRSV）的定量检测。方法：用纳米磁珠法提取病毒RNA,构建包含烟草环斑病毒全CP序列的质粒标准品。根据CP保守序列设计特异性的引物和TaqMam荧光探针,构建标准曲线,建立TRSV的实时荧光绝对定量PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行评估。结果：建立的方法特异性好,与南芥菜花叶病毒、马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒均无交叉反应 至少能检测到767个病毒拷贝,灵敏度比普通PCR高100倍 同一样品试验内及试验间重
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