【摘 要】
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用胆总管结扎的方法制备狗肝纤维化模型，12周后取肝分离Ito细胞，并进行鉴定和培养。经用TGFβ1和IFN—α2b孵育后用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分离细胞总RNA。对含有Ⅰ、Ⅱ型前
【机 构】
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上海医科大学附属中山医院200032
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用胆总管结扎的方法制备狗肝纤维化模型，12周后取肝分离Ito细胞，并进行鉴定和培养。经用TGFβ1和IFN—α2b孵育后用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分离细胞总RNA。对含有Ⅰ、Ⅱ型前胶原cDNA片段的质粒分别进行扩增和提纯，酶切后用自由引物延伸法进行地高辛标记，以制备Ⅰ、Ⅱ型前胶原探针。用此探针与Ito细胞总RNA进行斑点杂交，杂交斑点行灰度数字转换和半定量分析。结果显示，TGFβ1能够促进Ito细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达，而IFN—α2b则能明显抑制Ito细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。据此认为
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