款冬花DNA提取及ISSR体系优化研究

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为了从分子水平对款冬种质资源进行鉴定和遗传多样性分析,分别采用SDS法、CTAB法、改良SDS法和改良CTAB法提取款冬叶片基因组DNA,并用改良CTAB法提取的DNA进行ISSR-PCR扩增体系摸索,建立优化的ISSR-PCR反应体系。结果显示:改良SDS法和改良CTAB法都可以提取出高质量的DNA,最优的ISSR-PCR反应条件为:20μL反应体系中含DNA模板约20ng,Taq酶1.0U,Mg2+2.00mmol/L,dNTPs0.20mmol/L,引物0.6μmol/L,1×PCR缓冲液
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