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原核表达载体pET28a-3×flag-LukS-PV的构建与表达鉴定

来源 :山西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：conanyuexin

【摘 要】

：

目的 构建原核表达载体pET28a-3×flag-LukS-PV,并在大肠杆菌中进行表达纯化及鉴定。方法 通过PCR扩增得到LukS-PV基因和3×flag基因,经琼脂糖凝胶电泳分离切胶回收

【作 者】

：

汪自然 马凡 王杨燕 马筱玲 

【机 构】

：

安徽医科大学附属省立医院检验科

【出 处】

：

山西医科大学学报

【发表日期】

：

2020年1期

【关键词】

：

金黄色葡萄球菌 基因表达 纯化 Staphylococcus aureusgene expressionpurification 

【基金项目】

：

国家自然科学基金面上项目(81572065)

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目的 构建原核表达载体pET28a-3×flag-LukS-PV,并在大肠杆菌中进行表达纯化及鉴定。方法 通过PCR扩增得到LukS-PV基因和3×flag基因,经琼脂糖凝胶电泳分离切胶回收后与pMD-18T载体连接。通过NdeⅠ和Bam HⅠ对pMD-18T-3×flag载体和pET28a载体进行双酶切后,连接得到pET28a-3×flag载体。使用Bam HⅠ和XhoⅠ分别对pET28a-3×flag载体和pMD-18T-LukS-PV进行双酶切,连接

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