鸡γ-干扰素基因的克隆及原核表达

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参照Digby发表的鸡γ-干扰素的核苷酸序列,设计一对引物,应用RT-PCR.技术,从ConA诱导过的鸡脾淋巴细胞中特异性地扩增出大小约为500bp的基因片段。将该扩增基因进行克隆测序,结果表明其序列与Digby报道的CHIFN-γ基因序列的同源性达100%。将该基因插入原核表达载体pGEX-4T-1中构建成重组表达载体pGEX-CHIFN-1,并将其导入大肠杆菌BL21中,诱导表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析,分子量约为43ku,表明所克隆的CHIFN-γ基因在原核细胞中得到了表达。
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