人RhoC基因正、反义真核表达载体的构建及对肿瘤增殖的影响

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目的 构建人RhoC基因正、反义真核表达载体,研究RhoC基因对胆管癌QBC939细胞株增殖的影响.方法应用分子克隆技术,用KpnⅠ和BamHⅠ双限制性内切酶从RhoC 基因切下所需目的片段,然后将该片段正、反向定向克隆到真核表达载体pcDNA 3.1/Hyg(+)上,构建正、反义RhoC cDNA真核表达载体,以脂质体转染人胆管癌QBC939细胞,检测细胞生长曲线.结果经测序鉴定,将正、反义目的片段成功的连接到pcDNA3.1/Hyg(+)载体上.结果序列测定证实RhoC基因正、反义真核表达载体成功构建,反义RhoC基因抑制QBC939细胞增殖,正义RhoC基因促进QBC939细胞增殖.结论成功地将RhoC目的片段正、反向插入到pcDNA3.1/Hyg(+)中,构建了人RhoC正、反义表达真核载体,RhoC基因调控QBC939细胞增殖。

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