人博卡病毒重组蛋白表达及间接酶联免疫法检测的建立

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目的:原核表达并纯化人博卡病毒结构蛋白VP2,并建立间接酶联免疫法,用于病毒感染的检测。方法:本研究采用PCR法从菌种模板WHL-1扩增出人博卡病毒结构蛋白VP2基因片段,克隆至表达载体pET28a中,转化到菌B121(DE3),经过诱导产生融合蛋白,使用Westernblot检测,并以该蛋白为包被抗原建立检测血清人博卡病毒的间接酶联免疫法。结果:重组原核表达质粒经双酶切鉴定构建正确.并可与人博卡病毒IgG阳性血清发生特异性反应,建立的间接酶联免疫法最佳抗原包被浓度为2mg/mL,血清的最佳稀释倍数为1:
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