SARS病毒S蛋白N端片段真核载体的构建及酵母表达菌株的建立

来源 :江苏大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：allsky_

【摘要】

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目的:构建SARS冠状病毒S蛋白N端1～501bp的真核表达载体,并分析其在毕赤酵母GS115中的表达情况.方法: 用PCR方法从质粒pGEX-6P-1+SARS-S上扩增出S编码基因片段,克隆至真核表达

【作者】

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汤巧钱超夏永祥卢春

【机构】

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南京医科大学微生物学与免疫学系,南京医科大学微生物学与免疫学系,南京医科大学附属南京第一医院检验科,南京医科大学微生物学与免疫学系

【出处】

：

江苏大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2005年5期

【关键词】

：

SARS冠状病毒 S蛋白真核表达毕赤酵母 SARS-CoV S protein Eukaryotie expression Piehia Pas

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目的:构建SARS冠状病毒S蛋白N端1～501bp的真核表达载体,并分析其在毕赤酵母GS115中的表达情况.方法: 用PCR方法从质粒pGEX-6P-1+SARS-S上扩增出S编码基因片段,克隆至真核表达载体pPIC9上,构建重组质粒pPIC9+SARS-S.重组质粒经酶切鉴定和核苷酸测序鉴定后,转化毕赤酵母GS115,用甲醇诱导重组S蛋白片段表达.结果: 酶切鉴定及核苷酸序列测定表明重组真核表达质粒的构建完全正确.对甲醇诱导后重组毕赤酵母培养上清行SDS-PAGE电泳分析,在相对分子量约为41 000处

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