【摘 要】
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目的:浅析CRISPR/CAS系统诱导的哺乳动物细胞基因组突变,并比较相关检测方法的效果。方法:使用Cas9系统,在人293T细胞的打靶载体构建基础上,对相关基因实行定点的敲除,并使用
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目的:浅析CRISPR/CAS系统诱导的哺乳动物细胞基因组突变,并比较相关检测方法的效果。方法:使用Cas9系统,在人293T细胞的打靶载体构建基础上,对相关基因实行定点的敲除,并使用Surveyor检测法、AFLP检测法以及HRM检测法检测打靶效率。结果:CRISPR/CAS系统诱导的哺乳动物细胞基因组突变率为40%。另外,在三种检测方法中以HRM检测最佳,Surveyor检测次之,而AFLP检测最差。上述两两间具有统计学意义(P<0.05)。结论:CRISPR/CAS系统具有显著打靶效果,且操作比较简单,同时该系统识别效率比较高。HRM具有很高的检测效率,是一种良好的突变检测方法。
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