【摘 要】
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目的:多肽MC10(MARAKEGGGC)介导的聚乙烯亚胺-β-环糊精聚合物载体作为新型靶向性非病毒基因载体的研究。方法:低分子量的聚乙烯亚胺(PEI)通过羰二咪唑(1,1’-carbonyl-diimi
【机 构】
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浙江大学化学生物和药物研究所,浙江大学医学院免疫学研究所
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2007AA03Z355);国家重点基础研究规划(973)资助项目(2004CB518802);国家自然基金项目(30571068);浙江省自然科学基金重点项目(Z207572)
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目的:多肽MC10(MARAKEGGGC)介导的聚乙烯亚胺-β-环糊精聚合物载体作为新型靶向性非病毒基因载体的研究。方法:低分子量的聚乙烯亚胺(PEI)通过羰二咪唑(1,1’-carbonyl-diimidazole,CDI)偶联β-环糊精(β-CyD)合成聚乙烯亚胺-β-环糊精(PEI-β-CyD)作为载体骨架,用琥珀酰亚胺-3-(2-嘧啶二硫)丙酸酯[N-succinimidy-3-(2-pyridyldithio)propionate,SPDP]将MC10偶联到PEI-β-CyD上,制成新型转基因载体材料MC10-PEI-β-CyD。用核磁共振氢谱(1H-NMR)对载体的结构进行化学表征,凝胶电泳阻滞实验研究载体材料对质粒DNA的浓缩能力,透射电镜观察其浓缩质粒DNA后形成的微粒粒径。MTT法检测聚合物的毒性,用SKOV-3、A549和MCF-7细胞株进行体外转基因实验,确定MC10-PEI-β-CyD具有基因携带能力及靶向选择性。结果:成功地合成了MC10-PEI-β-CyD,且MC10-PEI-β-CyD在N/P为5时,能够有效浓缩质粒DNA,形成粒径约为(170±35)nm的微粒。结论:MC10-PEI-β-CyD具有低毒和高转基因效率,对Her-2受体的肿瘤细胞具有很好的靶向性。
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