【摘 要】
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目的 鉴于万古霉素的治疗指数低,易引起耳、肾毒性等,研究建立一种测定万古霉素血药浓度的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法,满足临床对其进行常规治疗药物监测需求.方
【机 构】
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解放军总医院第八医学中心药剂科,北京,100091
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目的 鉴于万古霉素的治疗指数低,易引起耳、肾毒性等,研究建立一种测定万古霉素血药浓度的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法,满足临床对其进行常规治疗药物监测需求.方法 以Agilent Poroshell120SB C18色谱柱(4.6 mm×50 mm,2.7 μm)为分析柱,甲醇-0.2％乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI),以正离子模式,多重反应监测(MRM)方式进行检测.以去甲万古霉素为内标,万古霉素:m/z 725.7→144.1,去甲万古霉素:m/z 717.8→144.1.样本经甲醇沉淀蛋白后进样分析,进样量5μl,分析时间为7.5 min.结果 样本中内源性物质对测定无干扰,万古霉素线性范围为1.0～102.0 μg/ml,线性范围内线性关系良好.所建方法日内、日间精密度(RSD)及准确度(RE)均＜15.0％,提取回收率81.0％～85.0％,基质效应小,稳定性好.用HPLC-MS/MS方法和化学发生微粒子免疫检测法(CMIA)分别对50例样本进行测定,CMIA法所测结果均值较HPLC-MS/MS方法所测结果均值高3.3 μg/ml,经统计学分析二者无显著性差异(t=1.935,P=0.056),以HPLC-MS/MS方法测得的结果对CMIA法测得的结果进行相关性分析,二者具有一定的相关性(r=0.9463).结论 研究建立的测定万古霉素血药浓度的HPLC-MS/MS方法,特异性好,准确度高,稳定性好,线性范围宽,且在线性范围内线性关系良好,可满足高通量测定.
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