【摘 要】
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目的 构建耶尔森菌HPI毒力岛全岛缺失突变载体，为进一步构建HPI全岛缺失株打下基础。方法根据已知小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因序列设计PCR引物，扩增并克隆irp8结构基因，作
【机 构】
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南方医科大学流行病学教研室,中国疾病预防控制中心传染病研究所,南方医科大学南方医院感染内科
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目的 构建耶尔森菌HPI毒力岛全岛缺失突变载体，为进一步构建HPI全岛缺失株打下基础。方法根据已知小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛基因序列设计PCR引物，扩增并克隆irp8结构基因，作为同源重组的一侧序列，以irp5的部分序列作为同源重组的一侧序列，并将之克隆入同一载体，中间插入有卡那霉素(Km)基因(kan)、抗性标记。以自杀质粒pcvD442为载体．构建了含有irp8基因和Irp5部分序列的缺失突变载体pCO85。结果构建的突变载体经酶切及PCR鉴定克隆片段大小与预期一致。结论成功构建了致耶尔森菌HPI
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