【摘 要】
：
目的 克隆人前列腺癌基因1(PCAN1)5′上游2.6kb启动子片段,构建pGL3-p2.6kb载体, 测定其启动子活性,初步鉴定该片段内的DNA调控区域.方法 采用PCR法从人基因组DNA中扩增PCAN1
【机 构】
：
山东大学附属省立医院耳鼻喉头颈外科,济南,250022;山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,济南,250012
论文部分内容阅读
目的 克隆人前列腺癌基因1(PCAN1)5′上游2.6kb启动子片段,构建pGL3-p2.6kb载体, 测定其启动子活性,初步鉴定该片段内的DNA调控区域.方法 采用PCR法从人基因组DNA中扩增PCAN1基因5′上游2.6kb启动子片段,并构建到荧光素酶报道基因载体pGL3-basic中,构成pGL3-p2.6kb;瞬时转染前列腺癌细胞LNCaP,通过双荧光素酶活性检验测定PCAN1启动子活性. 使用Erase-a-system对pGL3-p2.6kb载体中2.6kb片段进行一系列5′侧翼缺失,产生12个缺失体,分别瞬时转染LNCaP细胞,通过检测荧光素酶的活性观察缺失突变对PCAN1启动子活性的影响.结果 克隆的PCAN1 2.6kb启动子片段经测序鉴定正确无误; pGL3-p2.6kb转染LNCaP细胞后,双荧光素酶活性测定结果显示2.6kb片段具有明显的启动子活性;5′缺失突变分析显示,PCAN1基因上游-1599bp至-1541bp、-347bp至-84bp的缺失,与2.6kb片段相比,启动子活性分别升高2.24倍和2.53倍,-1541bp至-1226bp的缺失,与2.6kb片段相比,启动子活性降低2.11倍.结论 克隆的人PCAN1基因5′上游2.6kb片段具有较强的启动子活性,PCAN1基因上游2.6kb区域内分别存在2个负调控区和1个正调控区.
其他文献
重庆水泥工业始于１９３６年。时至今日有大小水泥企业１７４家，年生产能力２５００万吨。２０００年，实际生产水泥１５００万吨，市场实际需求为１４００万吨。全行业处于总量过剩，结构失衡，规模偏小，无序竞争，价格低迷（均价比９０年代初
China to invest $532 million in Rwanda in 2011 CHINA will invest about $532 million in Rwanda this year,mainly targeting critical economic engines such as buil
本文通过阐述传统精益生产理论存在的问题，指出了传统精益生产方式的缺点，并提出了对精益生产改进的一些观念。
<正>今年以来,在大力推动去杠杆过程中,债务违约事件明显增加,对金融市场投资者风险偏好影响比较大,实体层面也出现一些担忧。去杠杆怎么去,对经济影响怎么样?这是我们判断未
本文指出中国企业境外投资呈现出建厂不断增加、投资地域较为集中等特点,投资地域的集中化给我国企业带来诸多风险,包括政治风险、经济风险、法制风险、文化风险,建议中国企
１０月２８日，位于济南民营科技产业园内的济南国际装饰材料会展中心建成开业。１００多家中外客商代表及数百名业内人士到场祝贺。济南国际装饰材料会展中心是济南市２００１年重点建设的十大市场之
醒目去晚会的路上,趁坐出租车的空档,拿出随身化妆包,赶紧补上神来之笔:涂上眼部清新霜,抹点胭脂,再喷爽齿剂——既有薄荷清香又增加牙齿光亮度,明眸皓齿谁家靓女? 晨香摄入
摘 要：随着知识经济时代的到来，物流企业发展迅速，成为国民经济的新增长点。由于物流业可以有效节省人力和财力，提高运营效率，因此，物流业的发展越来越受到各行各业的重视。然而，知识全球化的快速发展使我国物流企业在发展壮大的过程中，也遇到了新的问题和挑战，其中，制约物流企业快速穩定发展的一个重要因素是当前形势下人力资源管理表现出来的薄弱状态。本文以S物流公司为例，主要从其人力资源管理面临的问题入手，分析
社团活动是培养大学生创新能力的重要载体,作为培养高素质创新型人才主阵地的高等学校是推进民族创新体系建设的重要力量,高校通过大力开展大学生社团活动对于推进创新教育,
临床资料本组108例中,男76例,女32例;年龄14～74岁;病程1 d～20年;有明显外伤史71例,劳损37例.均经X线、CT扫描确诊.