【摘 要】
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目的克隆登革2型病毒(DEN2)NS3基因并用酵母真核表达,获得全长的重组NS3蛋白质,为其结构与功能的研究提供条件.方法从感染DEN2(NGC株)后病变的C6/36细胞上清液中提取RNA,通过
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目的克隆登革2型病毒(DEN2)NS3基因并用酵母真核表达,获得全长的重组NS3蛋白质,为其结构与功能的研究提供条件.方法从感染DEN2(NGC株)后病变的C6/36细胞上清液中提取RNA,通过RT-PCR扩增NS3基因片段,与载体pPICZαB连接筛选得到重组质粒,电穿孔法将重组体整合入酵母菌P.pastoris,经抗生素Zeocin筛选产生的转化子进行表型鉴定,取Mut+菌诱导表达,SDS-PAGE检测表达产物.结果 RT-PCR得到1.85kb的NS3基因片段,酶切鉴定与测序显示重组质粒含DEN2全
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