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本文建立了 UFLC-MS/MS法同时测定黄芪桂枝五物汤中4个活性成分(毛蕊异黄酮苷、桂皮酸、芍药苷和芍药内酯苷)的含量.采用Shim-Pack XR-ODS柱,0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL/min.采用3200 QTRAP三重四极杆串联质谱仪,电喷雾电离源,负离子检测,多重反应检测(MRM).毛蕊异黄酮苷、桂皮酸、芍药苷和芍药内酯苷分别在0.2～10.0 μg/mL(r=0.9999)、0.5～25.0 μg/mL(r=0.999 8)、2.0～100.0 μg/mL(r=0.999 6)、0.5～25.0 μg/mL(r=0.999 5)呈良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为98.5％、99.0％、98.7％和98.8％.6批黄芪桂枝五物汤样品含量测定结果:毛蕊异黄酮苷0.143～0.153 mg/mL、桂皮酸0.109～0.123 mg/mL、芍药苷2.881～2.990 mg/mL、芍药内酯苷0.436～0.446 mg/mL.结果表明该方法快速、准确,可用于黄芪桂枝五物汤的质量标准研究,同时为其在兽药领域开发提供参考.