应用实时荧光PCR检测各种环境标本中的嗜肺军团菌

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目的:评价实时荧光PCR在检测各种环境标本中嗜肺军团菌的应用效果。方法选择针对mip基因的引物和探针,优化实时荧光PCR的反应条件,并对嗜肺军团菌和其他非嗜肺军团菌进行检测,验证方法的敏感性、特异性和重复性。将实时荧光PCR检测各种环境标本中嗜肺军团菌的效果与传统培养法进行比较。结果实时荧光 PCR 法最低检测限达6 CFU/mL。该方法特异性好,嗜肺军团菌呈现阳性结果,而非嗜肺军团菌均为阴性结果。重复性好,Ct 值变异系数较小。从菌株核酸的提取至检测完成仅需2 h左右。实时荧光PCR法和传统培养法的检测嗜肺军团菌的阳性率差异有统计学意义(P<0.05),实时荧光PCR检测敏感性优于传统培养法。结论实时荧光PCR具有较好的敏感性、特异性和快速的特点,适于各种环境标本中嗜肺军团菌污染状况调查及应急事件的快速检测。
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