【摘 要】
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目的 观察木犀草素对小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)的极性及其炎性因子表达的影响,初步探讨木犀草素调控BMDM的极性而抑制炎症的机理.方法 以C57BL/6小鼠取材的BMDM为研究对
【机 构】
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南京医科大学免疫学系,江苏南京211166;南京中医药大学附属中西医结合医院检验科,江苏南京210028;南京中医药大学附属中西医结合医院分子实验室,江苏南京210028
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目的 观察木犀草素对小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)的极性及其炎性因子表达的影响,初步探讨木犀草素调控BMDM的极性而抑制炎症的机理.方法 以C57BL/6小鼠取材的BMDM为研究对象,10 ng/ml脂多糖(LPS)和20 ng/ml干扰素(IFN)-γ刺激BMDM发生M1极化,20 ng/ml IL-4刺激其M2极化;实验分为对照(Control)组;LPS+IFN-γ刺激(M1)组;IL-4刺激(M2)组;木犀草素(2.5/5μmol/L)处理组分别为M1+2.5L和M1+5L;激光共聚焦显微镜观察BMDM的形态;FCM检测BMDM的纯度和膜表面分子CD11c和CD206的水平;qPCR和ELISA分别检测M1型和M2型炎性因子mRNA和蛋白的变化;Western-blot检测p-STAT1和p-STAT6蛋白通路的表达.结果 分离的小鼠骨髓干细胞成功诱导分化为BMDM,LPS+IFN-γ诱导BMDM极化为M1型,IL-4诱导其极化为M2型;木犀草素作用后:M1极化的BMDM所表达的M1型致炎因子下调、M2型抗炎因子上调;M1细胞膜表面M1型标志分子CD11c的表达下调、M2型标志分子CD206的表达上调;炎症信号通路蛋白p-STAT1的水平下降,而p-STAT6的水平上升.结论 木犀草素可能通过调节p-STAT改变BMDM的极性从而调节炎症介质的表达.
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