【摘 要】
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目的 建立超顺磁氧化铁(SPIO)、绿色荧光蛋白(EGFP)双标胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰中脑神经干细胞.方法 以质粒pEGFPNl-GDNF转染大鼠胚胎中脑神经干细胞,SPIO标
【机 构】
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中日友好医院神经外科,北京,100029昆明医学院第一附属医院神经外科;中日友好医院放射诊断科;华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科;中日友好医院临床医学研究所;
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目的 建立超顺磁氧化铁(SPIO)、绿色荧光蛋白(EGFP)双标胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰中脑神经干细胞.方法 以质粒pEGFPNl-GDNF转染大鼠胚胎中脑神经干细胞,SPIO标记细胞.荧光显微镜、免疫细胞化学和Western blot鉴定EGFP、GDNF表达;普鲁士蓝染色、透射电镜鉴定SPIO标记率;诱导分化后免疫细胞化学鉴定其分化能力.结果 基因转染12 h后EGFP开始表达;免疫细胞化学、Western blot表明GDNF能正确表达;普鲁士蓝染色示SPIO标记率达100%,透射电镜示SHO颗粒位于吞饮小泡和胞质内;体外诱导分化研究表明SPIO、EG-FP双标记不影响其分化.结论 成功建立SPIO、EGFP双标GDNF基因修饰中脑神经干细胞.
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