【摘 要】
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目的建立并优化结肠癌肝转移患者血清蛋白质组双向电泳分离技术。方法对2-DE的各种条件进行调整、优化,通过双向电泳图谱比较各种方法对血清蛋白的分离效果。结果采用pH4~7胶
【机 构】
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重庆市渝北区人民医院普通外科,重庆医科大学附属第一医院胃肠外科,重庆医科大学基础医学研究所,
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目的建立并优化结肠癌肝转移患者血清蛋白质组双向电泳分离技术。方法对2-DE的各种条件进行调整、优化,通过双向电泳图谱比较各种方法对血清蛋白的分离效果。结果采用pH4~7胶条,含尿素9M、硫脲2M的上样缓冲液,12.5%的SDS-PAGE胶提高了血清蛋白的分离效果。结论血液中高丰度蛋白质的去除能提高了2-DE图谱的斑点数和分辨率。成功建立了血清蛋白质的纯化技术,为寻找疾病的血清学标志物的研究奠定基础。
Objective To establish and optimize two-dimensional electrophoresis separation of serum proteome in patients with liver metastasis from colon cancer. Methods Various conditions of 2-DE were adjusted and optimized, and the separation results of serum proteins by various methods were compared by two-dimensional electrophoresis. Results The separation efficiency of serum protein was improved by using pH4 ~ 7 strips, loading buffer containing urea 9M and thiourea 2M, and 12.5% SDS-PAGE gel. Conclusion The removal of high abundance proteins in the blood can increase the number of spots and the resolution of 2-DE patterns. The successful establishment of serum protein purification technology, to find the disease serological markers laid the foundation for the study.
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