小鼠B7-H4重组蛋白的表达及鉴定

来源 :浙江大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：claverchou

【摘要】

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目的：构建小鼠B7-H4胞外区基因的真核表达载体，转染酵母细胞以表达mB7-H4，并检测其生物学活性。方法：以roB7-H4的重组质粒为模板，在克隆引物上加入XhoI和EcoRI酶切位点，并用PCR方法

【作者】

：

钱韵姚航平程林芳沈玲古丽娟陶岚张立煌

【机构】

：

浙江大学免疫学研究所,浙江大学医学院附属第一医院

【出处】

：

浙江大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

遗传载体重组蛋白质类 mB7-H4 重组表达免疫抑制 Genetic vectors Recombinant proteins mB7-H4 Recomb

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目的：构建小鼠B7-H4胞外区基因的真核表达载体，转染酵母细胞以表达mB7-H4，并检测其生物学活性。方法：以roB7-H4的重组质粒为模板，在克隆引物上加入XhoI和EcoRI酶切位点，并用PCR方法扩增得到mB7-H4胞外区的基因片段，经XhoI和EcoRI双酶切后接入酵母表达载体Ppic9上，构建成Ppic9-mg7-H4重组质粒。经双酶切和核酸测序鉴定，将该重组质粒转染至酵母细胞，用PCR、Western Blot及ELISA等方法检测重组基因的表达，并鉴定表达蛋白的生物学活性。结果：转染Ppic

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