pcDNA3.1-mAFP真核表达载体的构建及其在293细胞中的表达

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tedloo

【摘要】

：

目的构建真核表达载体pcDNA3．1-mAFP，观察其在293肿瘤细胞中的表达情况。方法从Hepal-6小鼠肝癌细胞中提取总RNA，设计特异性引物，通过RT-PCR法扩增小鼠甲胎蛋白（mAFP）基因编码区全

【作者】

：

匡志鹏谢裕安梁安民罗小玲吴继宁

【机构】

：

广西医科大学附属肿瘤医院生物医学研究中心

【出处】

：

中国现代医学杂志

【发表日期】

：

2007年9期

【关键词】

：

小鼠甲胎蛋白重组真核表达载体 pcDNA3.1 原发性肝癌

【基金项目】

：

国家自然科学基金(30360114)

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目的构建真核表达载体pcDNA3．1-mAFP，观察其在293肿瘤细胞中的表达情况。方法从Hepal-6小鼠肝癌细胞中提取总RNA，设计特异性引物，通过RT-PCR法扩增小鼠甲胎蛋白（mAFP）基因编码区全长序列，测序确认后，插入到pcDNA3．1真核表达载体中，双酶切鉴定。用Lipofectamine脂质体将构建的重组载体转染293肿瘤细胞，检测AFP蛋白在293细胞中的表达情况。结果成功克隆了mAFP基因编码区全长序列，构建出重组真核表达载体pcDNA3．1-mAFP，脂质体转染后可检测到mAFP基因

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