bFGF cDNA重组逆转录病毒表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wolaixunbao
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目的建立逆转录病毒介导的人bFGF体外表达体系.方法应用DNA重组技术,将人bFGF cDNA片段重组到逆转录病毒质粒pLXSN中,经PA317细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染COS-7细胞,用RT-PCR和Western Blotting检测bFGF mRNA和蛋白表达.结果重组pLXSN-bFGF质粒,经酶切鉴定正确.重组逆转录病毒pLXSN-bFGF滴度可达2.3×104CFU/ml,感染COS-7后能稳定表达.结论逆转录病毒能介导人bFGF在哺乳动物细胞中的稳定表达,本研究为下一步开
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