【摘 要】
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[目的]探究2,2’,4,4’,5,5’-六氯联苯(PCB153)对人肾上皮细胞系(293T)细胞中长散在重复序列-1(LINE-1)基因表达和转座的影响。[方法]293T细胞每2 d传代一次,传代后立即使用
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(编号:21647008);天津市科技支撑计划(编号:16YFZCSY00900);国家重点研发计划(编号:SQ2017YFSF080109)
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[目的]探究2,2’,4,4’,5,5’-六氯联苯(PCB153)对人肾上皮细胞系(293T)细胞中长散在重复序列-1(LINE-1)基因表达和转座的影响。[方法]293T细胞每2 d传代一次,传代后立即使用5μmol/L PCB153进行染毒。染毒后的细胞置于37℃、体积分数5%CO2培养箱中继续培养,连续染毒10 d。同时设置二甲基亚砜(DMSO)对照组。采用实时荧光定量PCR技术检测LINE-1开放阅读框1(ORF-1)和开放阅读框2(ORF-2)基因的m RNA表达水平及拷贝数,LINE-1拷贝数增加反映其发生转座。Western blot检测LINE-1 ORF-1和ORF-2蛋白表达水平。[结果]与对照组比较,从第4天开始PCB153染毒组细胞中LINE-1 ORF-1 m RNA表达水平增加(P<0.05),从第6天开始PCB153染毒组细胞中LINE-1 ORF-2 m RNA表达水平增加(P<0.05)。染毒第10天时,与对照组(LINE-1 ORF-1:2.74±0.51;LINE-1 ORF-2:0.57±0.10)相比,PCB153染毒组的LINE-1 ORF-1蛋白表达水平(4.39±0.85)和LINE-1 ORF-2蛋白表达水平(0.78±0.10)均明显增加(P<0.05)。染毒第10天时,PCB153染毒组与对照组的LINE-1 ORF-1拷贝数分别为1.43±0.64和0.83±0.37,LINE-1 ORF-2拷贝数分别为1.11±0.52和0.81±0.12,差异均具有统计学意义(P<0.05)。[结论]PCB153暴露可增加LINE-1的表达和拷贝数,诱导其转座。
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