套式序列特异引物聚合酶链反应技术的建立及其在HLA配型中的应用

来源 :中华器官移植杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lijb2009
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建立套式序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法,用于HLA-DR基因分型.利用一对外引物扩增HLA-DRB1第2外显子部分片段(283bp),作为第2次扩增的模板,PCR循环参数:98℃、5分钟;94℃、60秒,72℃、30秒,63℃、30秒,15个循环;利用各组特异性引物进行第2次扩增,产生与血清学相对应的HLA-DR型别,PCR循环参数:94℃、30秒,72℃、30秒,60℃、30秒,20个循环.结果表明本方法特异性好.在7个家庭20例受试者中进行了应用,与血清学方法比较,两方法确定出的型别,80%一致,20%不同,另有血清学为"空"的8个型别,基因分型全部为DR9阳性.

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