【摘 要】
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目的探讨褪黑素对帕金森病大鼠转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）的调控作用及其对小胶质细胞活化的影响。方法取SD大鼠72只,按照随机数字表法分为对照组、模型组、褪黑素（5 mg/kg）组、Nrf2抑制剂全反式维甲酸（ATRA,7 mg/kg）组、Nrf2抑制剂阴性对照（Nrf2-NC）（植物油,10 mL/kg）组、褪黑素+ATRA（5mg/kg+7 mg/kg）组
【机 构】
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河南大学第一附属医院麻醉与围术期医学科
【基金项目】
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河南高等学校重点科研项目（19A320021）；
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目的探讨褪黑素对帕金森病大鼠转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）的调控作用及其对小胶质细胞活化的影响。方法取SD大鼠72只,按照随机数字表法分为对照组、模型组、褪黑素（5 mg/kg）组、Nrf2抑制剂全反式维甲酸（ATRA,7 mg/kg）组、Nrf2抑制剂阴性对照（Nrf2-NC）（植物油,10 mL/kg）组、褪黑素+ATRA（5mg/kg+7 mg/kg）组,每组12只。除对照组外,其余各组大鼠通过脑黑质区内注射6-羟多巴胺（6-OHDA）建立帕金森病模型。造模成功后各组开始给药,模型组和对照组ip等量生理盐水,各组连续给药8周,2次/d。末次给药后对大鼠进行行为学评分;免疫组化法检测黑质部多巴胺能神经元及小胶质细胞活化阳性染色细胞数目;免疫荧光共定位检测Nrf2、活化小胶质细胞（IBA1标记）重合表达的细胞数目;酶联免疫吸附法（ELISA）检测黑质部代谢产物α-突触核蛋白（α-Syn）和β淀粉样蛋白（Aβ）。采用Western blotting检测黑质部Nrf2、HO-1、肿瘤坏死因子（TNF-α）、环氧化酶2（COX-2）、小胶质细胞活化特异性标记物（OX-42）蛋白相对表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠出现单侧或双侧后肢部分瘫痪及行走、进食困难现象,行为学评分显著升高（P<0.05）。与模型组相比,褪黑素组大鼠出现行走时转圈,很少有瘫痪及行走困难症状,且行为评分降低（P<0.05）。ATRA组大鼠单侧或双侧后肢部分瘫痪大鼠例数增多,行为学评分最高（P<0.05）。与对照组相比,模型组大鼠黑质区Nrf2与IBA1重合表达细胞数目、小胶质细胞活化数目、α-Syn和Aβ水平及HO-1、OX-42、TNF-α、COX-2水平和细胞核中Nrf2表达水平升高（P<0.05）,多巴胺能神经元数目减少。与模型组相比,褪黑素组大鼠黑质Nrf2与IBA1重合表达细胞数目、多巴胺能神经元阳性染色数目、HO-1及细胞核中Nrf2表达升高（P<0.05）,小胶质细胞活化数目、α-Syn及Aβ水平、TNF-α、COX-2、OX-42表达降低（P<0.05）;ATRA组黑质区Nrf2与IBA1重合表达细胞数目、多巴胺能神经元数目、HO-1水平及细胞核中Nrf2水平降低（P<0.05）,小胶质细胞活化数目、α-Syn和Aβ水平、TNF-α、COX-2、OX-42表达水平进一步升高（P<0.05）。褪黑素+ATRA组大鼠上述指标变化与褪黑素组相反（P<0.05）。褪黑素+ATRA组及Nrf2-NC组上述指标与模型组相比差异无统计学意义。结论褪黑素可能通过激活Nrf2/HO-1通路,抑制炎症反应及小胶质细胞活化,减少帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元丢失。
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