乳糖诱导E.coli发酵生产FAD为辅基的葡萄糖脱氢酶

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【摘要】

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黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)为辅基的葡萄糖脱氢酶(FAD-GDH,EC1.1.5.9),具有辅基结合紧密、催化效率高的优点,可替代目前诊断用葡萄糖氧化酶应用于血糖指标的临床生化检测。本文

【作者】

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张玲宋祖坤林荣王男杨海麟

【机构】

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江南大学工业生物技术教育部重点实验室

【出处】

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化工进展

【发表日期】

：

2019年4期

【关键词】

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黄素腺嘌呤二核苷酸葡萄糖脱氢酶乳糖诱导发酵优化层析分离 FAD glucose dehydrogenase lactose induction ferm

【基金项目】

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江苏省产学研项目(BY2016022-40),国家轻工技术与工程一流学科自主课题(2018-23).

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黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)为辅基的葡萄糖脱氢酶(FAD-GDH,EC1.1.5.9),具有辅基结合紧密、催化效率高的优点,可替代目前诊断用葡萄糖氧化酶应用于血糖指标的临床生化检测。本文选取Burkholderia cepacia的葡萄糖脱氢酶基因(gdh)构建表达质粒pTrc99a-gdh,转化E. coli BL21(DE3)。异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导发酵,通过酶活测定及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,获得可溶性表达的FAD-GDH,分子量约为60000。利用乳糖替代IPTG作为诱导剂,摇瓶水平初步

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