【摘 要】
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为探究赤眼鳟遗传学和生理学实验室蛋白2 （laboratory of genetics and physiology 2， LGP2）的功能特征及抗草鱼呼肠孤病毒（grass carp reovirus， GCRV）育种参考潜力，实验克隆获得了2 940 bp的赤眼鳟lgp2（Sclgp2）全长cDNA和721 bp的5’端上游序列。Sclgp2 cDNA编码680个氨基酸，包含DEXDc （DE
【机 构】
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湖南农业大学湖南省特色水产资源利用工程技术研究中心
【基金项目】
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国家自然科学基金（32172966，31802288，U20A2063）； 湖南省教育厅资助科研项目（19B265）； 中央引导地方科技发展资金（2022ZYC085）；
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为探究赤眼鳟遗传学和生理学实验室蛋白2 （laboratory of genetics and physiology 2， LGP2）的功能特征及抗草鱼呼肠孤病毒（grass carp reovirus， GCRV）育种参考潜力，实验克隆获得了2 940 bp的赤眼鳟lgp2（Sclgp2）全长cDNA和721 bp的5’端上游序列。Sclgp2 cDNA编码680个氨基酸，包含DEXDc （DExD/H-box helicase domain）、HELICc （helicase superfamily C-terminal domain）和CTD （C-terminal regulatory domain）结构域；其5’端上游序列含有MafB （muscle aponeurosis fibromatosis B）和IRF3 （interferon regulatory factor 3）等转录因子结合位点。不同物种LGP2的功能结构域、磷酸化修饰位点数具有相似性，同时也存在结构域排布位置及序列的差异。赤眼鳟和草鱼lgp2 cDNA序列比较初步发现2个位于RNA结合功能区的GCRV抗性关联位点。系统进化分析显示赤眼鳟LGP2先与草鱼、鲫和青鱼聚在一起，再与鲤科鱼类等聚为一大支。荧光定量表达分析显示，赤眼鳟脾脏中sclgp2表达水平显著高于其他组织，肌肉、心脏中表达量次之，而肠中表达量最低。GCRV感染后，肝脏中ifn1表达水平在24～72 h显著下降，其他组织sclgp2和ifn1表达水平未有显著变化；相关性分析结果显示赤眼鳟肌肉sclgp2与ifn1表达水平呈极显著正相关（0.999）。酵母双杂交互作检测发现赤眼鳟LGP2与MDA5存在弱相互作用，而其DEXDc （1～201 aa）、HELICc （390～476 aa）以及CTD （553～668 aa）结构域与MDA5无互作。该研究成功获得了sclgp2全长cDNA及5’端上游序列，明确了其序列结构、免疫表达及与MDA5的互作特征，为赤眼鳟LGP2免疫功能属性研究奠定了基础，并为草鱼抗GCRV育种提供了参考。
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