弓形虫p30抗原基因体外扩增及其重组质粒构建

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为构建弓形虫主要表面抗原p30基因重组质粒,根据已发表的弓形虫主要表面抗原p30基因序列,设计合成引物P1、P2。在两引物的5末端分别加上了EcoRI、BamHI酶切位点,利用PCR技术获取p30抗原基因整个开放阅读框架的碱基序列。PCR产物经BamHI和EcoRI双酶切后,与经同样两种内切酶切割的质粒载体pBluescriptSK连接构成重组质粒pBluescriptSK-p30,转化大肠肝菌DH5α。通过遗传标记筛选、PCR扩增及酶切分析对重组子进行了鉴定证实构建了p30基因重组质粒。
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