重组pEGFP—C2-p100质粒构建及表达

来源 :天津医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wio120we
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:将人类p100基因定向连入pEGFP—C2质粒,使p100蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达,为进一步研究p100蛋白的功能及定位奠定实验基础。方法:采用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切方法,从pSG5-p100质粒中获得p100蛋白的cDNA全长;将该cDNA连接入pEGFP—C2质粒。将构建成功的pEGFP—C2-p100质粒转染入HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达。结果:(1)将该质粒进行双酶切鉴定可见p100片段。(2)转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:(1)
其他文献
目的:建立外标准法SYBR GREEN I实时定量(real-time)RT-PCR方法,以检测豚鼠TSHR分子免疫对BALB/c小鼠甲状腺TSHR mRNA的表达的影响.方法:取正常BALB/c小鼠甲状腺提取甲状腺总
目的:利用大鼠泌乳素(rPRL)的纯品和抗体,建立rPRL放射免疫分析(RIA).方法:以氯胺-T法制备125I标记rPRL,采用平衡竞争法建立rPRL RIA,并测定大鼠血清和垂体组织中rPRL含量.结