【摘 要】
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为建立牛传染性鼻气管炎（infectious bovine rhintracheitis, IBR）的血清学诊断方法，本试验对牛传染性鼻气管炎病毒（infectious bovine rhintracheitis virus, IBRV）gL蛋白进行原核表达和纯化，作为包被抗原，建立了间接ELISA检测方法。结果显示，iELISA方法的最优反应条件：抗原包被质量浓度为0.773 mg/L,4℃过夜
【机 构】
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河北科技师范学院河北省预防兽医学重点试验室
【基金项目】
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河北省重点研发计划资助项目（19226629D）； 河北省高等学校科学技术研究资助项目（BJK2022005）；
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为建立牛传染性鼻气管炎（infectious bovine rhintracheitis, IBR）的血清学诊断方法，本试验对牛传染性鼻气管炎病毒（infectious bovine rhintracheitis virus, IBRV）gL蛋白进行原核表达和纯化，作为包被抗原，建立了间接ELISA检测方法。结果显示，iELISA方法的最优反应条件：抗原包被质量浓度为0.773 mg/L,4℃过夜；3%BSA、37℃封闭1 h;血清1∶20稀释，室温孵育30 min;二抗稀释度为1∶5 000,37℃孵育30 min;底物反应条件为37℃5 min。特异性试验结果显示，该方法仅与IBR阳性血清反应呈阳性，而与牛口蹄疫（FMD）、牛病毒性腹泻（BVD）、布鲁菌病的阳性血清无交叉反应。敏感性试验结果显示，阳性血清1∶640稀释时检测结果仍呈阳性，表明该方法敏感性较高。重复性试验结果显示，批内变异系数为1.9%～7.7%,批间变异系数为2.6%～4.6%。对171份牛血清进行IBRV抗体检测，本试验建立的iELISA方法检出阳性样品67份，阳性率为39%;商品化试剂盒检出阳性样品60份，阳性率为35%,二者的阴性符合率为89.6%,阳性符合率为93.6%。本试验建立的iELISA方法可用于IBR的临床检测，为IBR的检疫防控提供技术支持。
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