【摘 要】
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以濒危物种狭叶坡垒硅胶干燥的叶片为材料,研究其RAPD-PCR体系优化条件。结果表明,优化的狭叶坡垒RAPD-PCR反应体系为:25μL体系中1×PCR buffer,3 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L d
【机 构】
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广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,桂林理工大学
【基金项目】
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广西植物研究所基本业务费支持项目(编号:桂植业12009);广西科技创新能力与条件建设项目(编号:桂科能11217028);科技部工作专项(编号:2009FY120200)
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以濒危物种狭叶坡垒硅胶干燥的叶片为材料,研究其RAPD-PCR体系优化条件。结果表明,优化的狭叶坡垒RAPD-PCR反应体系为:25μL体系中1×PCR buffer,3 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L dNTPs,0.5 U/25μL Taq聚合酶,0.4μmol/L引物,5 ng/μL DNA模板;最佳扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃退火1 min,72℃延伸1.5min,35个循环;72℃最后延伸7 min。
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