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【中图分类号】R457.1 【文献标识码】B 【文章编号】1550-1868（2014）12
【摘要】目的：分析卡式配血法中假阳性发生的原因，参照原因制定合理应对方法，以期能为预防及避免假阳性有所帮助。方法：对入住我院1023患者进行卡式配血实验的回顾性分析，找寻常见原因，依据原因分析制定应对措施。结果：1023例的患者通过卡式配血法检测出假阳性情况有16例，情况分别是血细胞发生融合的有3例，温育时间缩短有5例，离心速度和时间不足的有3例，标本发现高脂血的有4例，产生抗体有1例。结论：由于卡式配血法的操作简单、特异性好、结果准确、快速、灵敏度高、可以保存时间久，便于患者的会诊和复检。应该严格标准地应用卡式法配血法，可以通过建立结果的复检实验，用以保证准确度。
【关键字】卡式配血法；常见原因；应对措施。
临床上对患者进行血浆、红细胞悬液或者全血输注之前，需要在献血者和受血者之间的进行血液的交叉配血试验，保证安全输血。现如今，卡式配血实验，又称之为微柱凝胶免疫技术。是基于分子筛的过滤作用，利用梯度密度离心的方式将游离红细胞和凝集的红细胞进行分离[1]。配血实验中会经常会遇到血液凝集现象，而且程度有所不同，这些均会干扰结果的准确判断。而一旦出现假阳性，轻者影响了医师的判断，耽误治疗，重者会造成患者生命威胁，造成难以弥补的医疗事故。因此，本文通过临床实验，研究卡式配血中发生假阳性情况进行原因的分析，并且针对性的提出解决方案，现结果如下。
1. 资料与方法
1.1 研究对象
于2013年2月至2014年1月入住我院的1023例患者进行卡式配血实验研究，受血者样本的抗凝方式是采用EDTAK2（乙二胺四乙酸二钾）法。患者年龄分布在15-61岁之间，平均年龄33.6岁。所有患者排除家族遗传史、精神和意识障碍及严重心、肺、脑功能衰竭及严重并发症者。所有患者凝血功能正常，无严重的出血倾向。
1.2研究设备试剂长春博迅抗人球蛋白檢测卡 长春博研 TD-3A型血清学离心机 FYQ型免疫微柱孵育器
1.3研究方法
通过交叉配血的基本操作方法[2]，将献血者和受血者的全血标本取出后放入离心机种离心，用以红细胞的分离，再用等渗生理盐水分别将献血者和受血者的红细胞配成红细胞悬液，浓度为0.8%。首先核对后加入50ul献血者的红细胞悬液和50 uL的受血者血清到主侧的凝胶管中，再加入50 uL的受血者血清和50uL的受血者红细胞悬液到次侧凝胶管中，完成操作后将试剂卡放入37°C专用孵育器中温育约15 min左右，取出试剂卡后再使用双相离心机进行5 min的离心，随后取出试剂卡后观察最终结果。
一般来说，如果红细胞凝集块聚集在凝胶中或者表面的时候，会发生拖尾现象，即为红细胞凝集在一起，为阳性结果；若受血者与献血者血型相合，则红细胞会沉淀在凝胶管的底部， 表明为阴性结果。如果结果发生为阳性，需要对全血进行复检处理，首先就献血者和受血者的血型进行鉴定，并且复检对照采用试管法作为对比。此间，还需要检查实验仪器的参数是否正常，操作过程是否准确无误。
2结果
通过对1023例患者的全血进行卡式交叉配血实验，分析过程和结果发现，共有假阳性结果16例，分别是由于血细胞发生融合的有3例，温育时间缩短有5例，离心速度和时间不足的有3例，标本发现高脂血的有4例，产生抗体有1例。所以需要在受血者和献血者之间的进行交叉配血的基础试验，为了保证安全输血。
3. 讨论
抗人球蛋白检测试剂卡的设计原理是基于配血的微柱凝集。一般来说正常的血液中红细胞具有抗原，它会与相应的抗体反应，发生凝集，而抗人球蛋白检测试剂卡的微柱中含有特殊的物质，既为玻璃珠试剂与介质。实验过程中若是加入红细胞并进行离心后，红细胞发生凝集反应的话，会在离心的时候阻挡在玻璃珠的上方，同时没有发生凝集反应的的游离红细胞会在离心过程中通过玻璃珠的间隙到达试剂卡的微柱底[4]。但是这样还是存在一些假阳性情况。
本研究就输血科对于配血过程造成假阳性情况的的原因进行分析发现以下几种原因。第一种是急诊过程中为了尽快得知最终结果，会适当地缩短红细胞的温育时间，而且由于天气寒冷，温育时间变短，会出现冷凝集的情况，所以发生假阳性现象，一般来说这种情况可以通过检查仪器参数和试管法复检来进一步确认，因为卡式配血法表现为阳性，而试管法通过显微镜可以观察到聚集、凝集、假凝集情况。第二种情况是，随机抽的配血的标本，会有高脂血标本，这些样本血中含有颗粒状的物质，导致结果出现假阳性，一般遇到这样的情况，先用等渗生理盐水将高脂血标本的红细胞洗2～3遍，随后再配置成红细胞悬液，可以有效地预防发生假阳性[5]。第三种原因是配制不均的红细胞悬液，如果凝集红细胞在悬液中，并且被吸到凝胶管内，可能引发凝集红细胞发生抗凝不充分情况，这样的红细胞在凝胶柱内也会不能离心下去，最终造成假阳性，一般此种情况，我们通过试管法复检可以避免。还有一种原因是产生了不规则抗体，通过抗体筛查也可以检查到[6]。
由于卡式配血法的操作简单、特异性好、结果准确、快速、灵敏度高、可以保存时间就，便于患者的会诊和复检。更好地实现了医疗工作中的标准化和自动化，有效地提高了医疗管理水平。所以根据操作手册，严格按照要求进行试验，对于阳性结果进行复检，均可以提高试验的准确性。
总之，在临床中，输血治疗是较为常见的，输血前，做好配血试验可以保证治疗的顺利进行，更能保障受血者的安全。卡式配血法是临床常用的交叉配血试验，在操作时，遵循操作步骤，避免假阳性是必要的，应该得到临床广泛重视。
参考文献
[1]李育，柱凝集技术在交叉配血试验中的应用[J].浙江临床医学，2003，5（6）：464.
[2]陈燕萍，王长奇，朱方，等.微柱凝胶技术鉴定血型和筛检不规则抗体的临床应用[J].实验与检验医学，2008，126
[3]固朝春，蒋玲，陈丽梅，等.导致微柱凝胶卡式交叉配血试验假阳性结果的原因分析[J].国际检验医学杂志，2011，32（15）：1737—1738.
[4]龚建光，詹慧芳.19G抗一c致配血不合1例[J].检验医学与临床，2010，7（3）：284.
[5]杨江存，胡丽华.最新l临床输血质量管理手册[M].北京：人民卫生出版社，2001. （6）：719.
[6]王培华.输血技术学[M].2版.北京：人民卫生出版社， 2010：167—168.
【摘要】目的：分析卡式配血法中假阳性发生的原因，参照原因制定合理应对方法，以期能为预防及避免假阳性有所帮助。方法：对入住我院1023患者进行卡式配血实验的回顾性分析，找寻常见原因，依据原因分析制定应对措施。结果：1023例的患者通过卡式配血法检测出假阳性情况有16例，情况分别是血细胞发生融合的有3例，温育时间缩短有5例，离心速度和时间不足的有3例，标本发现高脂血的有4例，产生抗体有1例。结论：由于卡式配血法的操作简单、特异性好、结果准确、快速、灵敏度高、可以保存时间久，便于患者的会诊和复检。应该严格标准地应用卡式法配血法，可以通过建立结果的复检实验，用以保证准确度。
【关键字】卡式配血法；常见原因；应对措施。
临床上对患者进行血浆、红细胞悬液或者全血输注之前，需要在献血者和受血者之间的进行血液的交叉配血试验，保证安全输血。现如今，卡式配血实验，又称之为微柱凝胶免疫技术。是基于分子筛的过滤作用，利用梯度密度离心的方式将游离红细胞和凝集的红细胞进行分离[1]。配血实验中会经常会遇到血液凝集现象，而且程度有所不同，这些均会干扰结果的准确判断。而一旦出现假阳性，轻者影响了医师的判断，耽误治疗，重者会造成患者生命威胁，造成难以弥补的医疗事故。因此，本文通过临床实验，研究卡式配血中发生假阳性情况进行原因的分析，并且针对性的提出解决方案，现结果如下。
1. 资料与方法
1.1 研究对象
于2013年2月至2014年1月入住我院的1023例患者进行卡式配血实验研究，受血者样本的抗凝方式是采用EDTAK2（乙二胺四乙酸二钾）法。患者年龄分布在15-61岁之间，平均年龄33.6岁。所有患者排除家族遗传史、精神和意识障碍及严重心、肺、脑功能衰竭及严重并发症者。所有患者凝血功能正常，无严重的出血倾向。
1.2研究设备试剂长春博迅抗人球蛋白檢测卡 长春博研 TD-3A型血清学离心机 FYQ型免疫微柱孵育器
1.3研究方法
通过交叉配血的基本操作方法[2]，将献血者和受血者的全血标本取出后放入离心机种离心，用以红细胞的分离，再用等渗生理盐水分别将献血者和受血者的红细胞配成红细胞悬液，浓度为0.8%。首先核对后加入50ul献血者的红细胞悬液和50 uL的受血者血清到主侧的凝胶管中，再加入50 uL的受血者血清和50uL的受血者红细胞悬液到次侧凝胶管中，完成操作后将试剂卡放入37°C专用孵育器中温育约15 min左右，取出试剂卡后再使用双相离心机进行5 min的离心，随后取出试剂卡后观察最终结果。
一般来说，如果红细胞凝集块聚集在凝胶中或者表面的时候，会发生拖尾现象，即为红细胞凝集在一起，为阳性结果；若受血者与献血者血型相合，则红细胞会沉淀在凝胶管的底部， 表明为阴性结果。如果结果发生为阳性，需要对全血进行复检处理，首先就献血者和受血者的血型进行鉴定，并且复检对照采用试管法作为对比。此间，还需要检查实验仪器的参数是否正常，操作过程是否准确无误。
2结果
通过对1023例患者的全血进行卡式交叉配血实验，分析过程和结果发现，共有假阳性结果16例，分别是由于血细胞发生融合的有3例，温育时间缩短有5例，离心速度和时间不足的有3例，标本发现高脂血的有4例，产生抗体有1例。所以需要在受血者和献血者之间的进行交叉配血的基础试验，为了保证安全输血。
3. 讨论
抗人球蛋白检测试剂卡的设计原理是基于配血的微柱凝集。一般来说正常的血液中红细胞具有抗原，它会与相应的抗体反应，发生凝集，而抗人球蛋白检测试剂卡的微柱中含有特殊的物质，既为玻璃珠试剂与介质。实验过程中若是加入红细胞并进行离心后，红细胞发生凝集反应的话，会在离心的时候阻挡在玻璃珠的上方，同时没有发生凝集反应的的游离红细胞会在离心过程中通过玻璃珠的间隙到达试剂卡的微柱底[4]。但是这样还是存在一些假阳性情况。
本研究就输血科对于配血过程造成假阳性情况的的原因进行分析发现以下几种原因。第一种是急诊过程中为了尽快得知最终结果，会适当地缩短红细胞的温育时间，而且由于天气寒冷，温育时间变短，会出现冷凝集的情况，所以发生假阳性现象，一般来说这种情况可以通过检查仪器参数和试管法复检来进一步确认，因为卡式配血法表现为阳性，而试管法通过显微镜可以观察到聚集、凝集、假凝集情况。第二种情况是，随机抽的配血的标本，会有高脂血标本，这些样本血中含有颗粒状的物质，导致结果出现假阳性，一般遇到这样的情况，先用等渗生理盐水将高脂血标本的红细胞洗2～3遍，随后再配置成红细胞悬液，可以有效地预防发生假阳性[5]。第三种原因是配制不均的红细胞悬液，如果凝集红细胞在悬液中，并且被吸到凝胶管内，可能引发凝集红细胞发生抗凝不充分情况，这样的红细胞在凝胶柱内也会不能离心下去，最终造成假阳性，一般此种情况，我们通过试管法复检可以避免。还有一种原因是产生了不规则抗体，通过抗体筛查也可以检查到[6]。
由于卡式配血法的操作简单、特异性好、结果准确、快速、灵敏度高、可以保存时间就，便于患者的会诊和复检。更好地实现了医疗工作中的标准化和自动化，有效地提高了医疗管理水平。所以根据操作手册，严格按照要求进行试验，对于阳性结果进行复检，均可以提高试验的准确性。
总之，在临床中，输血治疗是较为常见的，输血前，做好配血试验可以保证治疗的顺利进行，更能保障受血者的安全。卡式配血法是临床常用的交叉配血试验，在操作时，遵循操作步骤，避免假阳性是必要的，应该得到临床广泛重视。
参考文献
[1]李育，柱凝集技术在交叉配血试验中的应用[J].浙江临床医学，2003，5（6）：464.
[2]陈燕萍，王长奇，朱方，等.微柱凝胶技术鉴定血型和筛检不规则抗体的临床应用[J].实验与检验医学，2008，126
[3]固朝春，蒋玲，陈丽梅，等.导致微柱凝胶卡式交叉配血试验假阳性结果的原因分析[J].国际检验医学杂志，2011，32（15）：1737—1738.
[4]龚建光，詹慧芳.19G抗一c致配血不合1例[J].检验医学与临床，2010，7（3）：284.
[5]杨江存，胡丽华.最新l临床输血质量管理手册[M].北京：人民卫生出版社，2001. （6）：719.
[6]王培华.输血技术学[M].2版.北京：人民卫生出版社， 2010：167—168.