【摘 要】
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目的进一步比较人外周血中γδT细胞及Vδ1~+、Vδ2~+、Vδ1~-Vδ2~-细胞频率、表型及功能方面异同,进一步了解γδT细胞在免疫应答中的作用。方法分离人外周血单个核细胞(PB
【机 构】
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中山大学中山医学院免疫研究所热带传染病教育部重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(31470888,3167050219)
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目的进一步比较人外周血中γδT细胞及Vδ1~+、Vδ2~+、Vδ1~-Vδ2~-细胞频率、表型及功能方面异同,进一步了解γδT细胞在免疫应答中的作用。方法分离人外周血单个核细胞(PBMCs),流式细胞术检测TCRγδ、Vδ1、Vδ2、CD4、CD8、CD45RO、CD62L、Granzyme A。PMA+Ionomycin刺激前后检测细胞因子IFN-γ、IL-17A及转录因子T-bet、Ro Rγt水平。磁珠富集、流式分选和ELISA检测纯化细胞IFN-γ产生。结果根据γδT细胞受体(TCRγδ)δ链,将γδT细胞分为Vδ1~+,Vδ2~+,Vδ1~-Vδ2~-3群,TCRγδ高低表达与Vδ1、Vδ2表达相关。Vδ1~+、Vδ2~+细胞约有20%~40%细胞表达CD8,低表达CD4,而Vδ1~-Vδ2~-细胞约有60%表达CD8和20%表达CD4。约6%的Vδ1~+和30%的Vδ1~-Vδ2~-细胞表达CD45RO,而约有80%的Vδ2~+细胞表达CD45RO。刺激后,γδT细胞3个亚群均表达IFN-γ和IL-17,Vδ2~+细胞表达最高,3个亚群差异有显著性,与纯化细胞结果相符。3个亚群细胞均高表达转录因子T-bet和Ro Rγt,高表达颗粒酶A。结论人外周血中Vδ1~+、Vδ2~+及Vδ1~-Vδ2~-细胞在频率、表型及功能方面均有显著差异,均可产生高水平细胞因子IFN-γ,该结果将为γδT细胞进一步研究打下良好基础。
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