PCR检测胚外体腔液细胞DNA产前诊断的初步研究

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目的:对胚外体腔液DNA进行定量分析,初步判定胚外体腔液中细胞的数目;应用PCR方法对胚外体腔液细胞DNA进行检测,预测胎儿性别,初步建立一套孕早期检测伴性遗传疾病的方法.方法:对25例孕6 -12周的孕妇在人流前行胚外体腔穿刺术,抽取胚外体腔液0.5-3ml,随后行人流术,取少量绒毛组织.采用煮沸法对25份胚外体腔液进行DNA抽提,Picogreen染料对25份胚外体腔液DNA进行定量.采用X,丫两对引物对25份胚外体腔液DNA进行PCR反应.绒毛组织进行染色体核型分析,与胚外体腔液的检测结果相对照.结果:0.5 - 3 ml胚外体腔液含有750-6270个DNA拷贝(细胞).男性血DNA扩增结果出现两条带(X ,Y)女性血出现一条带(X).25份胚外体腔液样本11份出现两条带确定为男性胎儿,14份出现一条带确定为女性胎儿,与绒毛染色体核型分析结果一致.结论:0.5 ml胚外体腔液DNA的含量就可满足PCR反应的要求.采用PCR技术对胚外体腔液细胞进行性别鉴定及伴性遗传病的研究,具有早期,快速,敏感的优点.
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