利用DNA改组筛选高活性抗凝血酶Ⅲ

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wangdaojin

【摘要】

：

目的利用DNA改组技术大幅度提高抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)的生物活性.方法采用RQ1 DNase Ⅰ不完全酶解ST-Ⅲ基因,产生长度为50～100 bp的随机片段,用低熔点胶回收.无引物PCR从小片段组

【作者】

：

于群宋丽雅贺敏卜凤荣孙文种窦桂芳章金刚

【机构】

：

北京输血研究所

【出处】

：

中国生物制品学杂志

【发表日期】

：

2005年1期

【关键词】

：

抗凝血酶Ⅲ AT-Ⅲ PCR DNA改组技术筛选引物 GS 毕赤酵母片段克隆 Antithrombin Ⅲ DNA shuffling P.pastor

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目的利用DNA改组技术大幅度提高抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)的生物活性.方法采用RQ1 DNase Ⅰ不完全酶解ST-Ⅲ基因,产生长度为50～100 bp的随机片段,用低熔点胶回收.无引物PCR从小片段组装成大片段,通过有引物PCR得到正确大小的片段.线性化的质粒通过电转转入毕赤酵母GS115细胞.结果获得了5株高活性的克隆.结论探索了在毕赤酶母进行DNA改组和筛选的方法和路线,成功进行了AT-Ⅲ的改组,并为其它分子的改组提供借鉴.

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