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目的：采用改良分次酶消化法体外分离培养家兔肌腱干细胞，观察其生物学特性，并进行诱导分化及鉴定。方法无菌条件下取出家兔髌腱组织，分别运用改良的分次酶消化法和酶消化后低密度稀释接种法进行分离、培养、传代，用倒置相差显微镜观察细胞形态特征并绘制两种方法的生长曲线，通过流式细胞鉴定仪检测肌腱干细胞表面抗原标志物的表达，取P3-P4代肌腱干细胞向成骨细胞、成软骨细胞诱导分化并鉴定。结果改良的分次酶消化法较酶消化后低密度稀释接种法细胞增殖速度加快，形态均一，杂质细胞少。分离出的肌腱干细胞表面抗原标志CD90、CD44