目的:建立测定人体血清和尿液中非那西丁及其代谢产物的液相色谱-串联质谱法。方法:用乙酸乙酯萃取血清和尿液中非那西丁及其代谢产物。色谱柱为Restek Allure PFPP柱(100 mm×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(30∶70,V/V),流速0.3 mL/min。以磺胺甲氧嘧啶为内标,非那西丁、对乙酰氨基酚和内标的多反应监测(MRM)离子对分别为m/z180→138、152→110和281→156。测定13名健康受试者口服非那西丁1.25 g后血清和尿液中非那西丁及其代谢产物的浓度。结果:非那西丁、对乙酰氨基酚和内标的保留时间分别为4.1、1.4和2.8 min。在0.2~50μg/mL范围内,非那西丁和对乙酰氨基酚的浓度与峰面积相关性良好(r>0.999 0)。非那西丁和对乙酰氨基酚的准确度分别为87.1%~101.5%和89.5%~107.3%,精密度分别为0.85%~7.83%和2.53%~8.74%,提取回收率为53.0%~76.0%,基质效应为92.0%~106.3%,均符合生物样本分析方法的有关要求。除万古霉素和甲泼尼龙外,其他临床常用药物对测定无干扰。13名健康受试者血清中非那西丁和总对乙酰氨基酚浓度为(5.94±4.79)和(8.81±2.91)μg/mL;尿液中非那西丁和总对乙酰氨基酚浓度为(3.25±1.10)和(570.45±187.13)μg/mL。结论:该方法简便、灵敏、特异性强,具有临床实用价值。