禽白血病病毒J亚群囊膜蛋白env基因的克隆和表达

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禽白血病病毒J亚群(ALV-J)是90年代鉴定出的ALV的新亚群,其囊膜蛋白env基因序别与ALVA-E亚群有相当大的差别。为研究ALV-Jenv基因及其表达产物的特点,用PCR方法扩增出ADOL-4817毒株的env基因,并克隆进TA载体,经电泳鉴定大小为1.7kb。将克隆出的env基因与杆状病毒pBlue-Bac4表达质粒DNA连接,构建成转移性载体pBac4817env,通过与Bac-N-Blue杆状病毒DNA共转染,获得了重组病毒rBac4817env-2。该重组杆状病毒感染Sf9细胞,能高效表达env基因产物。免疫荧光分析结果证明,单克隆抗体G2或多价兔抗envgp37血清能识别Sf9细胞中重组env基因表达的特异性抗原;Westernblotting分析结果表明,表达的重组基因产物的分子量大小约为90kD~94kD。用这些重组基因产物免疫鸡可以诱导鸡产生出高滴度的抗ALV-J特异性抗体。这一结果提示,这种杆状病毒表达的重组基因产物有助于ALV-Jenv基因生物学特性的深入研究。
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