非放射性反义RNA探针的原位杂交技术探讨

来源 :河南医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:firexuan1983
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以自制的反义RNA探针研究了非放射性标记原位杂交技术。结果表明:①以小柱装置提取质粒DNA,方法快速、简便、且纯度好;②以线性化的质粒DNA为模板进行体外转录,加Bio-14-CTP标记,需用pH8.0的转录缓冲液;③实验中需防止Rnase污染,但也可应用RNase作为实验对照和减低背景;④杂交液中以不加硫酸葡聚糖为宜,杂交温度以42℃为佳。
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