【摘 要】
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基于重组聚合酶扩增(RPA)技术和纸基电化学发光(ECL)技术,结合RPA高特异性、操作简便和ECL高灵敏度、快速等特点,建立了一种新型核酸检测方法。以乙型肝炎病毒(HBV)基因片段的质粒
【机 构】
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华南理工大学生物科学与工程学院,广州军区广州总医院医学实验科
【基金项目】
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国家青年自然科学基金(No.81401752);军队后勤科研计划(No.CGZ16J002);广州市科学(技术)研究专项(No.201607010121)
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基于重组聚合酶扩增(RPA)技术和纸基电化学发光(ECL)技术,结合RPA高特异性、操作简便和ECL高灵敏度、快速等特点,建立了一种新型核酸检测方法。以乙型肝炎病毒(HBV)基因片段的质粒为模板,设计特异性引物,对上游引物进行三联吡啶钌标记,生物素标记下游引物,通过RPA反应形成三联吡啶钌和生物素双标记的扩增子,链霉亲和素磁微球分离扩增子,纸基ECL检测三联吡啶钌信号。考察了上游引物三联吡啶钌标记效果,标记率为74.62%。优化了RPA反应参数条件,表明于30℃扩增20min即达到最佳核酸扩增效果。在HB
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