预测和印证调控蛋白激酶D1(PKD1)的微小RNA(miRNA)，探讨其在蛙皮素诱导的大鼠急性胰腺炎(AP)中发挥的作用。
方法生物信息学软件预测PKD1的上游调控miRNA，并通过双荧光素酶报告基因和Western blot验证目标miRNA对PKD1表达的调控。采用蛙皮素(20 μg/kg)腹腔注射(每隔1 h注射1次，连续6次)的方法构建AP模型。大鼠分为正常组(10只)、AP组(20只)和治疗组(20只)，其中，正常组不做处理，AP组和治疗组分别在造模前腹腔注射对照miRNA和带CY5荧光基因的miRNA模拟体。AP组和治疗组各取10只在首次注射蛙皮素后6 h处死，其余在首次注射后24 h处死。所有动物下腔静脉采血检测血清淀粉酶、脂肪酶活力；采集胰腺组织包埋切片行免疫组织化学染色检测PKD1的表达，HE染色进行AP病理评分。
结果TargetSacn7.1软件预测miR-128-3p为PKD1潜在的调控miRNA，双荧光素酶报告基因和Western blot证实miR-128-3p与PRKD1 mRNA 3′UTR结合，抑制PKD1的蛋白表达。造模后6 h，AP组与治疗组血清淀粉酶和脂肪酶活力较正常组增高[13 313.00(9 424.00～15 995.00) U/L、13 552.00(10 399.50～18 408.25) U/L比1 430.50(1 214.25～1 543.25) U/L；547.00(515.00～627.00) U/L、857.50(522.00～1 222.25) U/L比34.00(32.50～34.75) U/L]，差异均有统计学意义(χ2＝8.715，P<0.05；χ2＝9.115，P<0.05)，提示造模成功。造模后24 h，治疗组PKD1免疫组织化学评分[0.50(0～2.75)分]较正常组[4.00(4.00～8.00)分]和AP组[4.00(3.75～8.00)分]均下降，差异有统计学意义(χ2＝18.302，P<0.05)。炎性细胞浸润和组织坏死明显好转，病理评分总分显著低于AP组(3.80±0.85比6.90±1.15，t＝4.481，P<0.01)。
结论miR-128-3p是PKD1的上游调控miRNA，可抑制PKD1介导的AP大鼠的组织坏死和炎性细胞浸润。