pmCherry-N1-WWOX真核表达载体的构建及其在胆管癌细胞QBC939中的表达

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目的构建人脆性位点抑癌基因WWOX真核表达载体,并观察其在人胆管癌细胞株QBC939中的表达。方法通过全基因合成的WWOX cDNA为模版,用PCR技术扩增,将扩增片段连接到PUC57质粒,构建克隆载体,鉴定出阳性克隆后用DNA测序法鉴定重组质粒。将克隆载体与pm-Cherry-N1同时用Xho I/BamH I双酶切,构建真核表达载体pmCherry-N1-WWOX,以重组质粒转染QBC939细胞,通过Western blot检测转染细胞中WWOX的表达。结果成功扩增WWOX基因片段,重组质粒的酶切鉴定
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