【摘 要】
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目的 通过真核系统表达抗HBV preS1嵌合抗体4D11并分析其活性.方法 通过RT-PCR方法从分泌抗乙型肝炎病毒preS1的鼠源单克隆抗体4D11的杂交瘤细胞中克隆出抗体基因的重链可变区(VH)、轻链可变区(Vκ)序列,并分别克隆到含有人γ1重链和κ轻链恒定区序列的pcDNA3.1-AH和pcDNA3.1-Ak质粒中,共转染人胚肾细胞变种(293 FT)细胞.通过Western blot、竞
【机 构】
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361005,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门大学生命科学学院,361005,国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,厦门大学细胞生物
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目的 通过真核系统表达抗HBV preS1嵌合抗体4D11并分析其活性.方法 通过RT-PCR方法从分泌抗乙型肝炎病毒preS1的鼠源单克隆抗体4D11的杂交瘤细胞中克隆出抗体基因的重链可变区(VH)、轻链可变区(Vκ)序列,并分别克隆到含有人γ1重链和κ轻链恒定区序列的pcDNA3.1-AH和pcDNA3.1-Ak质粒中,共转染人胚肾细胞变种(293 FT)细胞.通过Western blot、竞争ELISA、阳性血清阻断及血清中preS1的检测实验来分析其活性.结果 轻重链基因在细胞内正确组装成嵌合抗体分子并分泌至细胞外,具有结合活性.嵌合抗体可以很好的与病毒preS1结合,对阳性血清的检测效果与鼠单抗一致.结论 成功的利用293 FT细胞表达了4D11嵌合抗体,抗体保留了原鼠单抗的特异性和活性,为探讨乙肝抗体的治疗提供了试验资料。
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