基于OverlapPCR方法进行猪伪狂犬病毒TK基因缺失载体的构建、鉴定及生物学分析

来源 :中国动物检疫 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mswangnan098

【摘要】

：

构建伪狂犬病毒TK基因缺失载体，在BHK-21细胞中表达，为研究TK基因生物学活性及其基因工程疫苗研制提供科学依据。根据伪狂犬病病毒SA株TK基因序列，设计引物，通过OverlapPCR扩增到

【作者】

：

毕研丽郭广君吕素芳魏凤沈志强

【机构】

：

山东省滨州畜牧兽医研究院,山东绿都生物科技有限公司

【出处】

：

中国动物检疫

【发表日期】

：

2011年2期

【关键词】

：

伪狂犬病病毒 TK基因 OverlapPCR 转移载体 pseudurabie virus TK gene. Overlap PCR： transfer pl

【基金项目】

：

滨州市应用技术研究与开发项目（200706）,院青年科技创新基金项目（2007-02）资助

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构建伪狂犬病毒TK基因缺失载体，在BHK-21细胞中表达，为研究TK基因生物学活性及其基因工程疫苗研制提供科学依据。根据伪狂犬病病毒SA株TK基因序列，设计引物，通过OverlapPCR扩增到长约1814bp的TK基因，与PMD18-T载体连接，将鉴定为阳性的重组质粒pMD—TK与表达载体pBluescriptsK（＋）分别用限制性内切酶BamHI、HindlII酶切后，定向亚克隆；重组表达质粒pBTK经PCR、酶切鉴定后，阳性质粒进行测序。利用脂质体介导阳性重组质粒pBTK转染BHK-21细胞，通过噬斑

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