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目的探讨联合应用p16、Ki-67免疫组化染色对宫颈上皮内瘤变(CIN)分级诊断的影响及其与宫颈人乳头状瘤病毒(HPV)感染的相关性。方法随机选取2014年6月-2017年2月淮安市妇幼保健院门诊经新柏氏液基薄层脱落细胞学制片技术筛查非典型鳞状细胞不能明确意义(ASCS)及以上患者60例,通过常规HE染色病理诊断分为炎症组30例、CINⅠ组12例、CINⅡ组10例、CINⅢ组6例及鳞癌组2例。对细胞学检测阳性的病例进行HPV分型检测以及宫颈阴道镜活检,宫颈活检标本常规石蜡HE制片并进行病理诊断分级,对病变最重组织蜡块联合应用p16、Ki-67免疫组化染色进行半定量评分。结果 Ki-67、p16阳性率分别为37. 87%、37. 91%,阳性率随宫颈病变级别的升高而升高,两者存在相关(Spearman秩相关系数=0. 874、0. 930,均P<0. 01)。p16阳性率与Ki-67阳性率在不同病变组差异均具有统计学意义(均P<0. 01);且p16、Ki-67阳性表达在宫颈CIN的二级分类中组间差异也具有统计学意义(P<0. 01)。联合p16、Ki-67半定量评分进行CIN病理分级诊断与常规HE染色病理分级诊断比较,两种方法在宫颈慢性炎组、CINⅠ组及CINⅡ级以上中诊断一致率分别为100. 0%、91. 7%及100. 0%。HPV总感染率为73. 64%,各组HPV感染阳性率随宫颈病变级别升高而增高。HPV16型感染与宫颈CIN二级分类病变程度间差异具有统计学意义(P<0. 05)。HPV感染率随p16表达强度的升高而增高。结论根据p16、Ki-67免疫组化半定量评分能够初步对CIN的病变程度做出评估。在利用HE切片光镜观察对CIN病理做出诊断时,联合p16、Ki-67免疫组化半定量评分能够在一定程度上提高病理诊断的可重复性及准确性。