改进竞争性RT—PCR法测定缺碘大鼠颅骨中BMP—2基因表达变化

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:SuperXF
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为更加精确地测定碘缺乏状态下大鼠颅骨组织中骨形态发生蛋白-2(BMP-2) mRNA表达水平,改进竞争性RT-PCR方法,探讨碘缺乏对骨骼发育影响的分子机制.将构建的DNA竞争模板克隆入pSportⅠ质粒中,利用pSportⅠ质粒中所含有的SP6 RNA聚合酶启动子序列,将DNA竞争模板在体外转录成为RNA.以此RNA作为竞争性RT-PCR中的竞争模板,与所提取的总RNA一同进行RT-PCR,消除逆转录效率对定量结果的影响.定量检测碘缺乏和正常大鼠颅骨总RNA中BMP-2 mRNA的水平.碘缺乏大鼠(1
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