【摘 要】
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目的构建国产基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI－TOF MS)仪的病原分枝杆菌鉴定数据库，评价其鉴定准确性并与国外同类产品比较。方法"中国病原分枝杆菌质谱数据库"的构建：收集分枝杆菌国际标准菌株19种、19株及"资源化"分枝杆菌临床分离株42种、183株；采用改良研磨－超声裂解法提取菌体蛋白。以国产MALDI－TOF MS仪(microTyper MS)为基础进行谱图采集及数据库构建，
【机 构】
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100730 首都医科大学附属北京同仁医院检验科,100730 首都医科大学附属北京同仁医院检验科,中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心,100730 首都医科大学附属北京同仁医院检验科,10073
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目的构建国产基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI－TOF MS)仪的病原分枝杆菌鉴定数据库，评价其鉴定准确性并与国外同类产品比较。
方法"中国病原分枝杆菌质谱数据库"的构建：收集分枝杆菌国际标准菌株19种、19株及"资源化"分枝杆菌临床分离株42种、183株；采用改良研磨－超声裂解法提取菌体蛋白。以国产MALDI－TOF MS仪(microTyper MS)为基础进行谱图采集及数据库构建，每株菌提取物平行滴加于12个靶点，每个靶点采集2次，得到24张质谱图；后按标准精选20张优质谱图，设置最大出峰数目、最小出峰频率及质量容差，经分析软件生成主谱图(MSP)。数据库验证：收集不同地区来源分枝杆菌305株，以16S rRNA基因、hsp65及rpoB测序为金标准，比较以本数据库为基础的microTyper MS与以Mycobacteria Library 3.0数据库为基础的进口MALDI－TOF MS仪(MALDI－TOF MS Microflex)鉴定分枝杆菌的准确性及谱图特征。
结果构建的"中国病原分枝杆菌质谱数据库"容量为42种、202株，平均每种纳入菌株4.8株，排在前10位的是堪萨斯分枝杆菌16株、胞内分枝杆菌16株、戈登分枝杆菌16株、偶发分枝杆菌16株、鸟分枝杆菌16株、脓肿分枝杆菌16株、结核分枝杆菌15株、马赛分枝杆菌11株、阿罗普研院分枝杆菌10株及yongongens分枝杆菌2株；305株验证菌株经测序确认为29种；基于本数据库，种水平鉴定准确率为99.67%(304/305)，高于MALDI－TOF MS Microflex(97.38%，297/305)，差异有统计学意义(χ2＝4.06，P<0.05)。
结论构建的"中国病原分枝杆菌质谱数据库"质量达到临床常规应用要求，就国内流行株而言，鉴定准确率优于国外同类产品。(中华检验医学杂志，2018, 41：519－526)
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