【摘 要】
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目的 研究在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 (RAFLS)信号转导中 ,酪氨酸激酶在TNF α刺激下丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinases ,MAPKs)活化中的作用。方
【机 构】
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北京大学人民医院骨关节病诊疗研究中心,第四军医大学生化系,北京大学人民医院妇科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目! (39730 430 )
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目的 研究在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 (RAFLS)信号转导中 ,酪氨酸激酶在TNF α刺激下丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinases ,MAPKs)活化中的作用。方法 原代培养类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞。应用Westernblot检测TNF α短时间内引起RAFLS蛋白质酪氨酸磷酸化状态改变 ,及其对MAPKs家族成员活化的浓度效应和时相特点 ;并应用genistein ,酪氨酸激酶 (PTK)抑制剂观察对MAPKs活化的抑制情况。结果 TNF α可以瞬时引起RAFLS蛋白质酪氨酸磷酸化程度增加 ;并在短时间内激活MAPKs通路 (ERK2、JNK2、P38)。不同浓度梯度TNF α作用显示 :10IU/ml时对ERK2、JNK2即可达到峰值活化 ,10 0IU/ml时P38达到最大活化。时间上 ,ERK2、JNK2、P38的活化分别在TNF α作用后 5min、15min、15min最明显 ;genistein对TNF α诱导的ERK2活化抑制作用显著 ,而对于JNK2、P38的抑制则较弱。结论 TNF α在RAFLS信号转导中 ,可以瞬时导致蛋白质酪氨酸磷酸化程度增加 ,并同时激活MAPKs 3条通路 ,但是对MAPKs 3个亚家族成员的活化具有异质性 ;PTK在TNF α导致ERK活化中发挥作用 ,对JNK、P38活化无明显影响
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