小反刍兽疫病毒疫苗株N和M基因的克隆、序列分析及原核表达

来源 :西北农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhjic

【摘要】

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摘要根据GenBank已登录的PPRV基因组序列，设计并合成2对特异性引物，以PPRV疫苗株基因组为模板，经RT-PCR扩增获得N和M基因并进行序列分析，再将2个基因插入到原核表达载体pET-28a中

【作者】

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何亚鹏鲍长磊张琪付明哲许信刚

【机构】

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西北农林科技大学动物医学院

【出处】

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西北农业学报

【发表日期】

：

2017年2期

【关键词】

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小反刍兽疫毒 N基因 M基因克隆序列分析原核表达 PPRV N gene M gene Clone Sequence analysis Prokary

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摘要根据GenBank已登录的PPRV基因组序列，设计并合成2对特异性引物，以PPRV疫苗株基因组为模板，经RT-PCR扩增获得N和M基因并进行序列分析，再将2个基因插入到原核表达载体pET-28a中，经鉴定正确后转化BL21感受态细胞进行IPTG诱导表达，并进行SDS-PAGE和Westernblot检测。成功克隆PPRv疫苗株N和M基因，重组菌经IPTG诱导后表达分子质量为57．7kuN蛋白（核衣壳蛋白）和38．1ku的M蛋白（基质蛋白），2个蛋白均能与小反刍兽疫阳性血清特异性结合，具有良好的反应原性

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